2.2.1 成魚(yú)行為測(cè)試

（1）群體出巢測(cè)試（Group emergence test）

目的：評(píng)估個(gè)體在群體中的冒險(xiǎn)行為傾向。

裝置：一個(gè)分為兩部分的透明水箱（33×13×13 cm），一側(cè)為稍暗的“暫養(yǎng)區(qū)"，另一側(cè)為明亮的“新異區(qū)"，中間隔板下方有一個(gè)2×2 cm的小門(mén)，可手動(dòng)控制開(kāi)關(guān)。

流程：

將10條魚(yú)放入居住區(qū)，適應(yīng)10分鐘。打開(kāi)小門(mén)，記錄每條魚(yú)從居住區(qū)進(jìn)入新異區(qū)的順序（出巢排名）。測(cè)試持續(xù)15分鐘，共進(jìn)行5輪，得到50條魚(yú)的排名（1~10，1為最先出巢，即最冒險(xiǎn)）。結(jié)果應(yīng)用：出巢排名越靠前，表示冒險(xiǎn)行為越強(qiáng)。

（2）個(gè)體出巢測(cè)試（Single emergence test）

目的：驗(yàn)證冒險(xiǎn)行為是否在時(shí)間上保持一致。

流程：

在群體測(cè)試3個(gè)月后，將每條魚(yú)單獨(dú)放入相同裝置，記錄其從居住區(qū)進(jìn)入新異區(qū)的時(shí)間（秒）。時(shí)間越短，冒險(xiǎn)性越強(qiáng)。使用高清攝像頭從上方錄制視頻，攝像頭安裝在1.5米高處。

（3）曠場(chǎng)測(cè)試 + 鏡像刺激（Open field test + mirror stimulation）

目的：評(píng)估與冒險(xiǎn)行為相關(guān)的探索行為、運(yùn)動(dòng)行為和攻擊性。

裝置：

水箱結(jié)構(gòu)與出巢測(cè)試類(lèi)似，但在新異區(qū)末端設(shè)置一面與水平面呈70°角的鏡子，使魚(yú)只能在靠近鏡子約4 cm（約1個(gè)體長(zhǎng)）時(shí)才能看到自己的鏡像。

流程：

魚(yú)在居住區(qū)適應(yīng)10分鐘，打開(kāi)小門(mén)，魚(yú)進(jìn)入曠場(chǎng)。記錄30分鐘內(nèi)的行為，包括：游泳速度，角速度，活動(dòng)狀態(tài)（高活動(dòng)、活動(dòng)、靜止，%），進(jìn)入鏡像區(qū)的次數(shù)與時(shí)間；攻擊行為頻率（AGRF，如咬鏡像、并行游泳、繞圈等，次/秒）。

分析工具：視頻數(shù)據(jù)使用諾達(dá)思的動(dòng)物運(yùn)動(dòng)軌跡跟蹤系統(tǒng)(EthoVision XT)進(jìn)行自動(dòng)軌跡追蹤與分析，攻擊行為由人工標(biāo)注。

2.2.2 幼魚(yú)行為測(cè)試：明暗測(cè)試（Light Dark Challenge, LDC）

目的：評(píng)估幼魚(yú)的焦慮樣行為。

裝置：使用諾達(dá)思的斑馬魚(yú)行為軌跡跟蹤系統(tǒng)(DanioVision)觀測(cè)箱，配有紅外照明和紅外敏感攝像頭，可從上方以60幀/秒記錄24孔板中每條幼魚(yú)的運(yùn)動(dòng)。

流程（以5 dpf幼魚(yú)為對(duì)象）。適應(yīng)期：光照條件下10分鐘；基線期：光照條件下10分鐘；

第一次暗期：5分鐘（模擬威脅）；第一次光期：10分鐘；第二次暗期：5分鐘；第二次光期：10分鐘。

分析參數(shù)：

游泳速度，角速度，彎曲度，加速度，活動(dòng)狀態(tài)。